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游离DNA大量提取试剂盒(磁珠法)图片
产品货号:
WE0504
中文名称:
游离DNA大量提取试剂盒(磁珠法)
英文名称:
Magbead Free-Circulating DNA Maxi Kit
产品规格:
48T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本试剂盒适用于从血浆、血清、羊水等无细胞体液中纯化回收游离DNA(Free-circulating/Cell-free DNA)。高盐时,游离DNA结合于硅基包被的磁珠表面。漂洗后,游离DNA洗脱于Buffer EB或去离子水中。游离DNA的得率与样品类型、储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠,可用于定量PCR、产前诊断等下游实验。




组分规格
Buffer MPL120mL
20% SDS6mL
Buffer GW1(concentrate)80mL
Buffer GCW2(concentrate)40mL
RNase-Free Water30mL
Proteinase K2×1.25mL
Magbeads ZN2×1mL

保存:Magbeads ZN 2~8℃,其余组分室温。


  • 第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1中加入无水乙醇。
  • 第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GCW2中加入无水乙醇。
  • 若手动操作,在实验开始前将恒温混匀仪预热至60℃。
  • Magbeads ZN严禁冰冻和高速离心,否则可能会对Magbeads ZN造成不可逆的损害。Magbeads ZN每次使用时请充分振荡混合均匀。
  • 用前请先检查Buffer MPL和20% SDS是否出现结晶或沉淀,如有结晶或沉淀现象,可在37℃水浴几分钟,即可恢复澄清。



  • 按下表向离心管中依次加入30μL Proteinase K、2mL血浆、100μL 20% SDS,放于60℃、1200rpm恒温混匀仪上震荡20分钟,孵育结束后将离心管冰浴5~10分钟。
    注:如无恒温混合仪,将离心管涡旋震荡10秒钟后放于60℃水浴锅中孵育20分钟,期间每隔7分钟涡旋震荡10秒钟。
    为避免蛋白酶K失活,请按下表试剂顺序依次加入,请勿将SDS直接加到蛋白酶K溶液中。
    成分血浆体积
    1mL2mL4mL10mL
    Proteinase K15μL30μL60μL150μL
    血浆样本1mL2mL4mL10mL
    20% SDS50μL100μL200μL500μL
    总体积1.065mL2.13mL4.26mL10.65mL
  • 孵育过程中,按下表准备裂解液/磁珠混合液,并混合均匀。
    成分血浆体积
    1mL2mL4mL10mL
    Buffer MPL1mL2mL4mL10mL
    异丙醇0.25mL0.5mL1mL2.5mL
    Magbeads ZN15μL30μL60μL150μL
    总体积1.265mL2.53mL5.06mL12.65mL
  • 将步骤2中准备的裂解液/磁珠混合液加到步骤1样本管中。涡旋震荡1分钟,然后手工上下颠倒或使用混匀仪混匀5~10分钟,使磁珠一直处于悬浮状态。
  • 将离心管放于磁力架上静置,待磁珠吸附到磁力架上,管内溶液变澄清后,翻转离心管冲洗瓶盖上残留磁珠,再放置1分钟左右,之后弃去溶液。
  • 向离心管中加入1mL Buffer GW1(使用前请检查是否已加入无水乙醇),震荡混匀后将混悬液转移到新的1.5mL离心管中。
  • 将离心管固定于磁力架上静置1分钟,之后弃去溶液。
  • 向离心管中加入1mL Buffer GW1(使用前请检查是否已加入无水乙醇),涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。
  • 将离心管固定于磁力架上静置1分钟,之后弃去溶液。
  • 向离心管中加入1mL Buffer GCW2(使用前请检查是否已加入无水乙醇),涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡结合2分钟。
  • 将离心管固定于磁力架上静置1分钟,之后弃去溶液。
  • 重复步骤9-10。
  • 离心管短暂离心后,将其重新固定于磁力架上用移液器去除管底溶液,开盖室温放置5~10分钟使乙醇充分挥发。
  • 向离心管中加入50~100μL RNase-Free Water后涡旋震荡使磁珠充分悬浮于洗脱液中,之后将离心管固定于25℃、1600rpm的恒温混匀仪上震荡洗脱10分钟。
  • 将离心管固定于磁力架上静置2分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。

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